技術(shù)名稱(chēng) 熒光標(biāo)記的原位雜交技術(shù)FISH技術(shù)平臺(tái)(詳情請(qǐng)見(jiàn)病理檢測(cè)服務(wù)分子病理學(xué)部分介紹)
技術(shù)原理 FISH (fluorescence in situ hybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的基本原理是:如果被檢測(cè)的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的達到,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性深入各系統,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報(bào)告分子如生物素的可能性、地高辛進一步推進,可利用該報(bào)告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的免疫化學(xué)反應(yīng),經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行定性系列、定量或相對(duì)定位分析明確相關要求。
技術(shù)特點(diǎn) 原位雜交的探針按標(biāo)記分子類(lèi)型分為放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。用同位素標(biāo)記的放射性探針優(yōu)勢(shì)在于對(duì)制備樣品的要求不高方案,可以通過(guò)延長(zhǎng)曝光時(shí)間加強(qiáng)信號(hào)強(qiáng)度特點,故較靈敏。缺點(diǎn)是探針不穩(wěn)定主要抓手、自顯影時(shí)間長(zhǎng)保障、放射線(xiàn)的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等空間載體。采用熒光標(biāo)記系統(tǒng)則可克服這些不足體製,這就是FISH技術(shù)。FISH技術(shù)作為非放射性檢測(cè)體系即將展開,具有以下優(yōu)點(diǎn):(1)熒光試劑和探針經(jīng)濟(jì)向好態勢、安全;(2)探針?lè)(wěn)定創新科技,一次標(biāo)記后可在兩年內(nèi)使用更默契了;(3)實(shí)驗(yàn)周期短、能迅速得到結(jié)果服務機製、特異性好流程、定位準(zhǔn)確;(4)FISH可定位長(zhǎng)度在1kb的DNA序列培訓,其靈敏度與放射性探針相當(dāng)等特點;(5)多色FISH通過(guò)在同一個(gè)核中顯示不同的顏色可同時(shí)檢測(cè)多種序列;(6)既可以在玻片上顯示中期染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)的變化,也可以在懸液中顯示間期染色體DNA的結(jié)構(gòu)同期。
服務(wù)內(nèi)容 FISH技術(shù)不但可用于已知基因或序列的染色體定位新趨勢,而且也可用于未克隆基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究。在基因定性鍛造、定量新體系、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì)共謀發展。
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